李俊雄医生的科普号

【摘要】 目的 探讨对哮喘者进行自血穴位注射治疗过程中的护理措施，观察各种护理措施的临床效果。方法 采用回顾性观察193例哮喘患者的穴位注射治疗护理过程，从而总结出护理体会。结果 193例患者整个治疗

[摘要] 目的 探讨自血穴位注射疗法治疗哮喘的分子机制。 方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，半定量测定自血穴位注射疗法治疗前后哮喘患者外周血单个核细胞（PBMC）中IL-4、IL-5、IL-10mRNA的表达情况。 结果 急性期时哮喘患者PBMC中IL-4mRNA与IL-5mRNA表达均增强，经自血穴位疗法治疗后，其表达同时显著降低；IL-10mRNA经自血穴位疗法治疗后表达显著升高。 结论 自血穴位注射疗法通过在基因转录水平抑制IL-4、IL-5的表达，增强IL-10的表达而发挥其对哮喘的治疗作用。[关键词] 哮喘 自血疗法 白细胞介素-4 白细胞介素-5 白细胞介素-10 支气管哮喘是一种由多种细胞因子和炎性介质参与的气道慢性炎症性疾病，本试验通过研究自血穴位注射疗法对哮喘患者治疗前后外周血单个核细胞（PBMCs） IL-4mRNA、IL-5 mRNA、IL-10 mRNA表达的影响，探讨其对哮喘基因表达及调控的影响，力图从基因表达水平阐明自血穴位注射疗法对哮喘作用的分子机制，为穴位注射疗法治疗疾病提供科学依据。材料和方法1、 主要试剂：总RNA提取试剂盒为GENTRA公司的RNA Isolation Kit；RT-PCR试剂盒为INVITROGEN公司产品。2、 引物的设计与合成：引物由上海申能博彩生物科技有限公司设计合成。 IL-4（375bp） 上游：5’-CTT CCC CCT CTG TTC TTC CTG CTA-3’下游：5’ CGT ACT CTG GTT GGC TTC CTT CAC 3’IL-5（239bp）上游：5’-ACC TTG GCA CTG CTT TCT ACT CA-3’下游：5’-ACT CTC CGT CTT TCT TCT CCA CAC-3’IL-10（309bp）上游：5’-CTG CTC TGT TGC CTG GTC CTC CTG-3’下游：5’-ATG CGC CTT GAT GTC TGG GTC TTG-3’3、 主要仪器： 3K18高速冷冻离心机（Sigma），LABOR-220电子天平（岛津），Mini电泳系统（Bio-rad），Spec 3000紫外/可见光分光度计（Amersham），Multi Genius凝胶成像系统（Syngene），2400PCR仪（PE）。4、 实验方法与步骤4.1 标本采集 根据中华医学会制定的哮喘诊断标准，于哮喘患者急性发作期和治疗缓解期分别肘静脉采血1ml，放入冻存管，置液氮中保存。4.2 总RNA提取及纯度检测 用GENTRA公司的RNA Isolation Kit提取总RNA，放-80℃冰箱保存。1.5%琼脂糖电泳检测其完整性。用紫外分光光度计测定样品在260nm/280nm比值及浓度。4.3 RT：取总RNA1ug，加50uM Oligo(dT)201ul，10mM dNTP混合物2ul，加灭菌水至总体积为12ul，小心混匀后于PCR仪上65℃孵育5分钟，取出后立即置于冰上。依次加入下列试剂：5倍RT 缓冲液4ul、0.1M DTT1ul、 RNA酶抑制剂1ul、DEPC处理水1ul、ThermoScripTM逆转录酶1ul，小心混匀后于PCR仪上55℃孵育30分钟、85℃5分钟，冰上冷却，立即PCR或置于-20℃保存。PCR：各样品取RT产物2ul再依次加入下列试剂：10倍PCR缓冲液5ul、50mM MgCL21.5ul、10mM dNTP混合物1ul、10uM上游引物1ul、10uM下游引物1ul、Platimun Taq酶0.4ul(2U)、灭菌水38.1ul，总体积为50ul，混匀后进行PCR扩增。反应条件为：IL-4、IL-10为94℃预变性2分钟，94℃变性30秒，58℃退火45秒，72℃延伸1分钟，共35个循环； IL-5、β-actin为94℃预变性2分钟，94℃变性30秒，55℃退火45秒，72℃延伸1分钟，共35个循环。4.4 电泳：各取PCR扩增产物10ul，加6×加样缓冲液，1.5%的琼脂糖凝胶电泳，电泳缓冲液为0.5×TBE,100伏恒压电泳1.5小时，经0.5ug/ml的溴乙淀（EB）染色10分钟，于凝胶成像系统中照像。并用凝胶成像系统自带分析软件分析，获得每一标本的各白细胞介素与内参β-actin PCR扩增产物的光密度比值，确定IL-4、IL-5和IL-10的mRNA表达半定量值。4.5 统计学处理：采用t检验。结 果一、总RNA 纯度鉴定260mm/280mm比值为1.8~2.0，琼脂糖凝胶电泳显示28S、18S两条带清晰，且前者的荧光强度约为后者的2倍，无其它大分子条带，表明总RNA无蛋白质污染，无降解。（补充图为） 二、IL-4mRNA表达的变化 M 1前 1后 2前 2后 3前 3后 4前 4后 5前 5后 6前 6后 7前 7后 8前 8后 M三、IL-5mRNA表达的变化M 1前 1后 2前 2后 3前 3后 4前 4后 5前 5后 6前 6后 7前 7后 8前 8后 M四、IL-10mRNA表达的变化M 1前 1后 2前 2后 3前 3后 4前 4后 5前 5后 6前 6后 7前 7后 8前 8后 M实验结果讨论：RT-PCR法以其灵敏、快速、简便、所需RNA量少等特点而广泛应用于基因mRNA表达的检测。由实验图谱我们可以看出，总体而言：哮喘病人经自血疗法后，其白介素4、5的表达下降，而白介素10的表达升高，反映自血疗法对哮喘确有一定疗效。具体有的病人的治疗前后表达量改变不明显，有的是因为病人治疗前的表达即无异常，有的可能是个体的基因多态性，当然，也不排除PCR技术本身的原因。

由广东省中医学会呼吸疾病专业委员会、广州中医药大学主办，广东省中西医结合医院、广东省中医院协办的“广东省中医呼吸研究生论坛”于2011年9月3日-4日在广东省中西医结合医院举行。来自全省各地就读于广州中医药大学各直属与非直属医院的 多位各届研究生参加了论坛。 中国工程院院士、广州呼吸疾病研究所所长钟南山教授为“广东省中医呼吸研究生”题词。2011年9月4日上午，研究生论坛举行开幕式，广州中医药大学刘小虹副校长、广东省中医药学会金世明副会长兼秘书长、广东省中医药学会呼吸病委员会林琳主任委员、广州呼吸疾病研究所钟南山院士的博士蔡闯副教授等领导和专家参加了开幕式并作了讲话，广东省中西医结合医院谢兵副院长致了欢迎辞。 研究生论坛特邀了钟南山院士的博士蔡闯副教授作了“”的讲座，他深入浅出地讲述了哮喘病的治疗与研究最新进展，特别用实例讲述了中医在呼吸疾病中的最新研究方向，提出了具体的期望。论坛还由广东省中医药学会呼吸病委员会主任委员林琳教授、广州中医药大学第一附属医院呼吸科主任张伟教授等分别作了 之后，来自各个附属医院的在读或已经工作的研究生踊跃走上论坛发言。他们有讲述临床研究经验如湛江第二中医院“”、省中医“林琳教授内外治综合治疗哮喘临床经验”和“”、江门中医院“”，实验研究的如中山中医院“”；亦有各方面治疗经验综述与分析，如“穴位注射、敷贴、埋线”、“点穴推拿”，还有近年来颇受关注的蜂针治疗哮喘等等。 所有这些贴近研究生临床学习、科研和实践的发言，都引起了参加论坛所有研究生的兴趣，大家进行了热烈的交流和讨论。 研究生论坛聘请的专家林琳教授、李俊雄教授、张伟教授、惠萍教授和简小云教授给发言的研究生从“研究的先进性、科学性与实用性；研究方法合理性和可行性；研究结果与结论”三个方面打分，评出一等奖名、二等奖名和三等奖名。论坛还进行了辩论赛“ 中医呼吸研究生如何看待掌握西医诊疗技术？（一方：中医呼吸研究生应以掌握中医诊疗技术为主，西医为辅。另一方：中医呼吸研究生必须掌握西医一系列诊治技术）”辩论双方已丰富的理论、翔实的论据、雄辩的口才进行了观点的碰撞与交流，通过这场辩论，使出场辩论的双方得到了锻炼，也使台下的听者开阔了视野。 与会专家和研究生一致认为：通过研究生论坛这种形式，提供了一个全新的平台，丰富了知识，培养了才干，增进了各自的认识和友谊，并以后继续通过各种方式如研究生QQ群（114039347）等保持沟通与互动，使各自通过研究生论坛及后续的交流进步早日、全面成才。

2011-09-05 09:04:16 来源：今日南海 跟贴 0 条本报讯（记者 余晖） 昨日上午，广东省中医呼吸研究生论坛在广东省中西医结合医院举行。来自省内多个中医院的专家及医学研究生相聚南海，以论文答辩比赛的方式，交流了各自医院治疗哮喘的方法。 据悉，城市患哮喘的人越来越多，尤其在青少年儿童人群中，发病年龄越来越小。为加强哮喘病防治的学术交流，广东省中西医学会呼吸病专业委员会、广州中医药大学主办了本次全省中医呼吸研究生论坛，来自省内多个医院的专家，首先发表了比较前沿观点。省哮喘专家蔡博士提出，在哮喘病防治上，医生应主动一点，病人会好很多，主动了解病人的生活习惯，多问问哮喘以外的症状，定期随访，说服病人坚持治疗等；而广东省中医院林琳教授则提出，医生应根据寒哮、热哮、风哮、瘀哮、虚哮等类别，祛邪治标，扶正治本。 来自中山、江门、深圳等地中医院的医学研究生们也提出了不同见解。其中，湛江第二中医院劳锦波提出桑白皮汤对支气管哮喘急性发作的帮助，省中医院的黄丽萍提出穴位推拿点穴法的理论。论文答辩优秀的医学研究生均获得了奖励。 在本次论坛上，哮喘专家和医学研究生们都有个基本共识，就是治疗哮喘中西医并不排斥，在西医药治疗急性发作之余，哮喘病人应该选用适合自己的中医方法、运动方法，最终达到标本同治。关键词：哮喘 中西医

2011年广东省中医呼吸研究生学术论坛通知“广东省研究生学术论坛”是近年在教育部相关精神指导下实施的研究生教育创新计划项目之一。该项目旨在为广东省的广大研究生提供一个学术交流的重要平台，促进研究生对社会热点问题的关注和学术素养的提高，营造高校的良好学术氛围。哮喘是随着现代化进程发病率越来越高的多因素诱发常见病、难治病。配合GINA规范化治疗加用中医药，特别是中医外治法（如针灸、穴位注射、按摩、敷贴、神灯等等），临床上大量病例证明其可取良效。为了共同探讨、相互交流、促进学术发展和提高临床疗效，广东省中医药学会呼吸病专业委员会、广东省中医哮喘联盟举办首届广东省中医呼吸专业研究生论坛，欢迎广东省各中医院的呼吸专业及相关专业研究生踊跃投稿，通过本次论坛的学术交流和讨论，将进一步开阔视野，增强研究生的创新能力，共同努力为提高广东省的中医呼吸医学学术水平作出应有的贡献。会议流程形式：1、专题报告2、优秀论文作者发言和专家点评3、研究生自由讨论的学术沙龙、专题辩论等主办单位：广东省中医药学会呼吸病专业委员会、广东省中医哮喘联盟一、 论坛主题：哮喘--中医、中西医结合治疗的探讨二、 举办时间：2011年8月27、28日（星期六、日）三、 举办地点：广东省中西医结合医院（佛山市南海桂城南五路16号）四、 征文对象 广东省各中医院呼吸专业及相关专业研究生（在读及近几年毕业已工作）五、征文要求1．论文属于原创性，具有科学性，格式符合研究规范，内容与论坛主题吻合。2、征文范围：哮喘的治疗（侧重哮喘的外治疗法）：中医；中西医结合；中医外治疗法：临床经验、相关基础研究（如何开展中医治疗哮喘的研究方法如循证医学等）、综述讨论和展望。3、来稿方式：本次论坛来稿只接受电子邮件。电子邮箱：lpy204@163.com ；ljx052@163.com。来稿截止时间：2011年8月20日。如超过这一期限投稿将不能参加优秀论文评审。投稿无需全文，论文摘要字数约500字，论文应具备的要素包括：标题、摘要、关键词、参考文献；来稿末尾附上作者详细信息，包括作者姓名、学校、院系、指导老师、专业、通讯地址、邮编、联系电话、e-mail地址。4．论坛将评选“优秀论文”，并给予一定的奖励，授证单位为广东省中医药学会。作为论坛交流论文，并设一、二、三等奖若干名。每位论坛交流作者准备10分钟之内的PPT发言。5.奖励办法：一等奖：颁发证书，奖金300元/名二等奖：颁发证书，奖金200元/名三等奖：颁发证书，奖金150元/名六、参与方式本论坛将为广州市以外的受邀学生免费提供工作餐和住宿，参会代表将免会议注册费、资料费、餐饮费。论坛征文现已开始，欢迎各中医院的呼吸研究生踊跃投稿。通过本次论坛，进一步启迪智慧，汇集成果，开阔视野，提高创新能力。七、联系方式联系电话：广东省中医哮喘联盟联络处 13549993249Email: lpy204@163.com ；ljx052@163.comQQ: 38327595广东省中医呼吸研究生学术论坛会务组2011-7-102011年广东省中医研究生学术论坛 日程安排（草稿）第一日（星期六）下午 外地学生报到 第二日 （星期日） 上午1. 学校研究生处领导致词2. 医院领导致词3. 学会领导致词4. 专题报告下午1. 研究生论文交流,专家点评2.研究生辩论发言3. 研究生优秀论文颁奖

香港大学进修见闻 ---阿雄 踏着秋日的红叶，我有幸获得奖学金来到了香港大学--这座有着超过100多年历史的全亚洲排名前列的高等学府访问进修学习。 之前的一年，经过激烈的层层比试，我成为了全国200多名竞争者最后10位中的一员—要知道，他们都是来自国内著名的高等医药院校及其附院：北京医科大学、上海医科大学、同济医科大学、中山医科大学、湘雅医科大学…自己过往的一些成绩与主考官们英语轮番轰炸中的不败阵，终于为我们作为基层医院、而且是古老祖国医学中的医院-南海中医院争得了荣誉。 香港大学，依傍港岛扯旗山蜿蜒而上，这里所属的十多个学院分布周围。我们所住的叫柏立基学院—这实际上是大学的高级宾馆，专门用来接待各国来校的专家教授及访问进修人员的。学院依山而建，清静而幽雅，房间窗口即可望见山下美丽的维多利亚港。学院内小型图书馆、会议室、各种娱乐运动场所如网球场、篮球场、乒乓球室、桌球室等一应俱全；接上互联网、学校信息库的电脑24小时开放并自由使用。而学院每周三自由参加的鸡尾酒会上，来自世界各国不同肤色的各个科学领域的学者举着自调的鸡尾酒杯随意地、天南地北地侃侃而谈，更加深了对相互间历史、文化、科技的认识和了解，这里不愧为中外文化的交汇之处。 如果要问，港大给人最深的印象是什么，我就要说，是浓郁的学术气氛。在我所到的港大医学院临床试验中心及附属玛丽医院所轮转过的急诊、病房、门诊中，学术科研的氛围环绕着你：墙上、板报上挂着的是大至国际小至校内系科内学术会、研讨会的通知；全球最新的医学信息几乎同步就可获取；很多各国各地来的都有自己的科研项目…在我所参与的一些科研项目中，临床试验中心教授学者们严谨治学的学风，给我深深的启示。正是这浓浓的学术氛围促使学术成果不断涌现（当然还有大量的经费投入—据说港大的科研经费就可顶内地几十间大学的经费），才使港大这一百年老校不断焕发活力，在从理工、资讯到生物、医学等领域都能保持龙头地位。 访问进修时间的日子过得飞快，如果不是不想进行中的课题项目中断，真希望与其他一些同来的同道一起享受港大奖学金读研究生。但鱼与熊掌不可兼得，只是希望用学到的知识，能作更好的服务，来有尽一份力提升祖国医学这一民族的瑰宝，这才会使自己少一点遗憾。 格物明德—这是港大的校训，也是希望所能追循的之一准则。